大家好,相信到目前为止很多朋友对于过滤除菌操作如何进行和过滤除菌操作如何进行使用前将滤器和过滤瓶不太懂,不知道是什么意思?那么今天就由我来为大家分享过滤除菌操作如何进行相关的知识点,文章篇幅可能较长,大家耐心阅读,希望可以帮助到大家,下面一起来看看吧!
1过滤灭菌的过程怎么做
灭菌过滤一般不能用布氏漏斗,可以用全玻璃过滤器
使用前将祥衡过滤器和滤膜都要在高压灭菌锅121度灭菌30分钟,然后要在无菌超净工作台上取出后安装到位,再进行过滤,过滤方式是抽滤没问题,如果你轮宴简还不清楚,可以来电021-56902220咨询,还有孔径问题,一般要达到完全除菌要选0.22微米的滤腊裤膜
2请问制备培养基时如何过滤除菌?
1、灭菌方法
培养基的灭菌方法主要有两种,高压除菌及0.22um微孔滤膜过滤除菌。与过滤相比老缓,高压灭菌的工作强度小,成本较低,但易造成营养成分的流失,而且在多次加样(无菌谷氨酰胺溶液,无菌碳酸氢钠溶液等)过程中容易造成二次污染。大多数培养基采用0.1~0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌,并且已成为培养基除菌的发展方向,它可低限度地减少培养基的营养损失。
1.1 高压灭菌
某些培养基(如MEM)可进行高压灭菌,例如清大天一的MEM培养基中的MD605、MD609等。这类培养基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠,一般是在培养基高压灭菌后加入L-谷氨酰胺和碳酸氢钠的无菌的液体。另外可高压的谷氨酸盐(如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)可代替L-谷氨酰胺。
可高压灭菌的培养基在121℃、15psi,15分钟的条件下完全可达到灭菌效果及营养成分的最小损失,不需将灭菌时间延长。为保证高压灭菌的效果,灭菌设备的验证很关键。
1.2 过滤灭菌
可供过滤灭菌使用的滤膜很多,其材料多为polyethersulphone(PES)、尼龙、多聚碳酸盐、醋酸纤维素、硝酸轮含段纤维素、PTFE、陶瓷等。一般情况下采取正压过滤,正压过滤较之负压过滤具有流速高、过滤快、不易污染,可避免蛋白质产生大量气泡等优点。一般使用过滤器可参照各供应商的产品说明书。
目前大多数实验室和制药企业采用微孔滤膜滤器(如Zeiss滤器)或立式微孔滤器(Millipore、Pall)除菌。微孔滤膜滤器为不锈钢,中间可夹放0.22um滤膜。使用这种滤器最重要步骤是安装滤膜及无菌过滤过程。如在使用Zeiss滤器时,先要用培养用水将滤膜充分润湿,在安装腊誉滤膜时可在其上放置一层定性滤纸再固定。消毒时旋钮不要扭太紧,凡与空气接触部位都要包好(可用牛皮纸、纱布、无纺布等);高压灭菌后,在无菌环境中立即将旋钮扭紧。过滤除菌结束后,要打开滤器,检查滤膜是否完整,如果滤膜破裂,需重新进行过滤除菌过程。立式微孔滤器可以选用不同的微孔滤柱体积,因为滤膜的折叠,膜面积显著增大,液体处理量大,而且不容易发生堵塞现象。
3求解过滤灭菌全过程,过程中都要用到什么部件?具体操作步骤是怎样的?问题有点儿繁琐,求耐心详解...
过滤灭菌主要需要四个东西:
1. 高压念羡灭过菌的无菌容器,用来盛放无菌溶液
2. 除菌滤膜,一般用0.22 um的滤膜或者滤器即可
3. 无菌的操作空间, 比如超净工作台
4. 注正猜射器(无需针头)
首先把盛放无菌溶液的容器高压灭菌,备用,
然后在超净工作台里,将滤器拆封,套在容器口上, 用注射器吸取未除菌的溶液, 然后插在滤器上,将溶液挤过滤器, 滤器下面流出来的仔清拍溶液即所需的无菌溶液.
如果要过滤大体积(2-10升)的溶液, 使用真空泵+滤器+滤膜会更加省力
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