dna提取（dna提取原理）-小美百科

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1提取DNA的方法总结

1、DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式：酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有硅质材料、阴离子交换树脂等。

2、通过添加RNase，消化RNA。通过加入浓盐然后离心分离细胞碎片、消化蛋白质、脂质和 RNA。用冰冷的乙醇或异丙醇乙醇沉淀 DNA。醋酸钠的离子强度可用于改善沉淀。沉淀的 DNA 在最终溶液中呈线状。

3、酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb。

4、析出溶解在NaC1溶液中的DNA。用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤：1．提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。

第一，时间不能过长，千万不要这时候去接电话，因为在这样的碱性条件下基因组DNA片断会慢慢断裂；第二，必须温柔混合，不然基因组DNA也会断裂。

取各上清时，不应贪多，以防非核酸类成分干扰。异丙醇，乙醇.NaAc，KAc等要预冷，以减少DNA的降解，促进DNA与蛋白等的分相及DNA沉淀。

选择的实验材料要新鲜，处理时间不易过长。在加入细胞裂解缓冲液前，细胞必须均匀分散，以减少DNA团块形成。提取的DNA不易溶解：不纯，含杂质较多；加溶解液太少使浓度过大。沉淀物太干燥，也将使溶解变得很困难。

1、dna的提取方法：浓盐法、SDS法、CTAB法等。浓盐法。根据DNA和RNA在电解溶液中的溶解度不同，可将二者分离。

2、此时DNA是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。

3、℃ 30min 或65℃ 15min。6．加等体积酸液（提取DNA中的蛋白质）缓慢来回颠倒离心管10min，13000-15000rpm离心 10min。

4、操作步骤：在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液Ⅰ，60℃水浴预热。幼苗或叶子5-10g，剪碎，在研钵中加液氮磨成粉状后立即倒入预热的离心管中，剧烈摇动混匀，60℃水浴保温30-60分钟(时间长，DNA产量高)，不时摇动。

5、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度；其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。

6、匀浆和细胞裂解：使用不同的实验材料需采用不同的匀浆步骤，具体说明如下：【从动物组织中提取基因组DNA】使用研钵进行匀浆时：① 取1～100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的研钵中，快速用力展研成匀浆。

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